高效液相色譜儀分離條件的選擇包括減小柱內和柱外展寬等條件。

　　一、 減小柱內展寬：

　　1、固定相：選用粒徑小、分布均勻的球形固定相。首選化學鍵合相，勻漿法裝柱。

　　2、流動相：選用低粘度的流動相，有利于增大組分在溶劑中的擴散系數，減少傳質阻力。

　　3、流速：約1mL/min。

　　4、柱溫：25℃左右。

　　二、減少柱外展寬：

　　1、柱前展寬：主要由進樣引起，減小進樣器的死體積。

　　2、柱后展寬：主要由接管、檢測器流通池體積和檢測器響應時間等引起。