茶氨酸（L-Theanine）是茶葉中特有的游離氨基酸，茶氨酸是谷氨酸γ-乙基酰胺，有甜味。茶氨酸含量因茶的品種、部位而變動(dòng)。茶氨酸在干茶中占重量的1%-2%。茶氨酸在化學(xué)構(gòu)造上與腦內(nèi)活性物質(zhì)谷酰胺、谷氨酸相似，是茶葉中生津潤(rùn)甜的主要成份。茶氨酸含量約為新茶的1～2%左右，其含量隨發(fā)酵過程減少.

圖為茶氨酸分子式

【茶氨酸的作用】

對(duì)中樞神經(jīng)影響：茶氨酸可以明顯促進(jìn)腦中樞多巴胺(dopamine)釋放 ，飲茶抗疲勞作用被認(rèn)為在一定程度上來自這一效果

降壓作用：茶氨酸對(duì)腦內(nèi)中樞神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺分泌量具有調(diào)節(jié)作用

影響記憶：茶氨酸可以增強(qiáng)記憶能力，提高學(xué)習(xí)效率

健康食品：保健食品市場(chǎng)上多數(shù)是為成人防病或改善作用的品種。像茶氨酸這種既不具有催眠，又可以解消疲勞、降低血壓和提高學(xué)習(xí)記憶能力的保健食品實(shí)為少見，引人注目。為此，茶氨酸曾在1998年德國召開的國際食品原料會(huì)上獲得研究部門大獎(jiǎng)。

    鑒于茶氨酸在市場(chǎng)上的應(yīng)用日趨增長(zhǎng)，賽智科技參照GB23193-2008，利用LC-10Tvp高效液相色譜儀給出了茶氨酸的HPLC檢測(cè)方案。

    （本應(yīng)用方案請(qǐng)勿轉(zhuǎn)載，侵權(quán)必究）

1、儀器與試劑

   1.1儀器、設(shè)備

   LC-10Tvp高效液相色譜儀

   Vertex 色譜柱：250mm×4.6mm×5μm

   分析天平

   振搖恒溫水浴

   離心機(jī)

   C18固相萃柱

   針頭過濾器

   微孔濾膜：0.45μm

   1.2試劑

　 茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品

　 鄰苯二甲醛（OPA)

　 乙硫醇

　 硼酸

　 氫氧化鈉

   甲醇（色譜純）

   乙腈（色譜純）　　

2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備

    對(duì)照品溶液的制備   取茶氨酸儲(chǔ)備液（1mg/ml)適量，用水稀釋成所需濃度。

　　供試品溶液的制備  

　　1、樣品前處理：茶葉樣品經(jīng)磨碎混勻后，準(zhǔn)確稱取0.5g（精確到0.001g），加水100ml，在80℃振搖恒溫水浴中浸提45min，冷卻后將浸提液離心，過濾，上清液混勻待用。

　　2、凈化：C18小柱活化：依次用5ml甲醇，5ml水加入到凈化小柱中，將上述試液過固相萃取柱，在經(jīng)過0.46um濾膜過濾到棕色試管中，待衍生用。

　　3、衍生：準(zhǔn)確吸取茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液（或樣品液）0.5ml于棕色試管中，加入0.5mlOPA衍生試劑，反應(yīng)2min后，立即取10ml上機(jī)分析。

3、色譜條件

色譜柱：C18, 4. 6 mmx250 mm，粒度5 μm

流動(dòng)相：以20mmol/l乙酸銨溶液為流動(dòng)相A，以20mmol/l乙酸銨溶液：甲醇：乙腈=1：2：2為流動(dòng)相B，VA:VB=1：1

波長(zhǎng)：338nm

流速：1. 0 mL/min

柱溫：40℃

4、測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得

5、譜圖

圖為茶氨酸樣品

圖為茶氨酸加標(biāo)曲線