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磷脂酰膽堿的高效液相色譜HPLC檢測(cè)方案


[磷脂酰膽堿]


磷脂酰膽堿是一種兩性分子,由親水的頭部和疏水的尾部組成。亦稱(chēng)卵磷脂。磷脂酰膽堿是磷脂的主要成分之一,從植物中提取的,磷脂酰膽堿將大腦的指令迅速傳遞,信息傳遞速度越快,記憶力越強(qiáng),是健腦食物。它能增強(qiáng)嬰兒智力,提高學(xué)習(xí)效率。尤其是胎兒,在生長(zhǎng)發(fā)育中對(duì)磷脂酰膽堿的需求極大。


以下是賽智科技利用LC-10Tvp高效液相色譜儀對(duì)磷脂酰膽堿進(jìn)行的HPLC檢測(cè)方案。


1、儀器與試劑


1.1儀器、設(shè)備


LC-10Tvp高效液相色譜儀

Sepax?HP-Silica?色譜柱:250mm×4.6mm×5μm 

分析天平

恒溫箱,溫度控制在100±1℃

微量進(jìn)樣器,(100μL)一支

漩渦混勻器

針頭過(guò)濾器

微孔濾膜:0.45μm


1.2試劑

甲醇:色譜純。

異丙醇:色譜純。

正己烷,色譜純。

冰醋酸:分析純。

三乙胺:分析純

去離子水

磷脂酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)液


2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備


對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備:   精密稱(chēng)取磷脂酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)品0.05g(精確至0.0001g),置于50ml容量瓶中,加甲醇與三氯甲烷的混合溶液溶解并稀釋至刻度,配成1mg/mL的磷脂酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,置-6℃下冷藏。


標(biāo)準(zhǔn)曲線系列濃度配置:朱雀吸取上述儲(chǔ)備液各1mL、2mL、4mL、8mL,分別置于10mL容量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,配成濃度分別為0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL及0.8mg/mL的磷脂酰膽堿溶液,用0.45um微孔濾膜過(guò)濾,待用。


供試品溶液的制備:   根據(jù)樣品中磷脂酰膽堿的含量,準(zhǔn)確稱(chēng)取試樣10mg~50mg,用流動(dòng)相溶解,超聲處理15min,并用流動(dòng)相稀釋至10ml。


3、色譜條件


Silica色譜柱:4. 6 mmx250 mm,粒度5 μm

流動(dòng)相:

流動(dòng)相A:甲醇:水:冰醋酸:三乙胺 = 85:15:0.45:0.05

流動(dòng)相B:正己烷:異丙醇:A = 10: 40: 50

波長(zhǎng):205nm

流速:1. 0 mL/min

柱溫:40℃


4、測(cè)定法


分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20ul,注入液相色譜儀,測(cè)定,即得


5、譜圖


標(biāo)準(zhǔn)品譜圖


圖片1.jpg


樣品譜圖


圖片2.jpg


儀器配置


表.jpg


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